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RNAfast200 总RNA极速抽提试剂盒

发布时间 2018-01-19
 

RNAfast200    RNA 极速抽提试剂盒

适用范围:动植物组织、细胞、细菌、病毒等Catalog no.220010 50

性能介绍

试剂盒组成

平衡液

5ml

裂解液RA2

30ml

洗液RW

60ml(使用前加入45ml无水乙醇)

洗脱液(RNase-free H2O

10ml

内套柱,外套柱

50

组织研磨器(筛网)

需要时另配(提取组织RNA时用)

说明书

1

 

技术支持:使用中遇到任何问题或建议,请使用E-mailxfyangbio@163.com或者13484545009)与我们的技术支持部门联系。资深技术支持将在2个工作日内给予答复。

 

 

 

 

 

操作流程

1. 关于平衡液的使用

   核酸吸附硅胶膜柱子长期放置过程中会老化而影响其核酸的结合能力。硅胶柱经平衡液预处理后可大大减少柱子中硅胶膜的憎水基团,提高核酸的结合能力。从而提高硅胶柱子回收效率或者产量。平衡液是强碱性溶液,若不小心碰到,请用大量自来水清洗。用完后需盖紧瓶盖,以免接触空气。室温保存。在保存过程中可能有沉淀生成,请加热至37℃使沉淀完全消失。

   使用方法:吸取100μl的平衡液至柱子中。13000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中废液,将吸附柱子重新放回收集管。此时平衡液预处理柱子完毕。接后续的操作步骤。

2 样本预处理

 培养细胞:如果是贴壁细胞,直接弃去上清(6孔板单孔),用滤纸吸走多余液体,而悬浮培养细胞或经消化脱落的贴壁细胞离心500g离心5分钟)收集,去上清,留下细胞团块,控制细胞<1×10

 组织块:新分离的组织或RNAwait中冻存的组织,放入组织研磨器(筛网)中,根据组织重量加入生理盐水(<50mg组织/ml,例如50mg组织加入生理盐水1ml以上),用研磨棒将组织轻轻研磨过钢网,立即收集过网滤液按500 g离心5分钟收集细胞,去上清,留下细胞团块。或者使用本公司的RNAfast1000试剂盒可以获得大量组织中的RNA

 细菌:取培养良好的细菌菌液100ul直接放入1.5ml eppendorf管中后进行提取。较稀的菌液取0.5-1ml离心后留下细菌团块及大约100ul上清,充分振荡悬浮细菌,直至没有细胞团块(重要)。

 病毒:取血清或血浆等样本液100ul,放入1.5ml eppendorf管中后进行提取。样本中有较多红细胞时需先低速离心去除红细胞。

 植物组织:鲜嫩植物组织(50mg)在液氮中研磨粉碎,待液氮蒸发后加入1ml生理盐水混匀,取100ul1.5ml eppendorf管中。

 抗凝全血及骨髓:先用淋巴细胞分离液分离获得的白细胞后,按照上述培养细胞的方法操作。

 血浆、腹胸水、脑脊液、羊水等:样本液混匀后直接吸取100ul放入1.5mleppendorf管中后进行提取,样本中应无红细胞或仅有少量红细胞,否则需先低速离心去除红细胞。或取腹胸水、脑脊液、羊水等大量液体样本离心,留下底部细胞及100ul上清,充分吹打混匀后吸取100ul放入1.5ml eppendorf管中后。

3.RNA提取

1) 处理好的样中,加入裂解液RA2500μl,充分吹打混匀5-10次,静置1min

2) 将样裂解物全部吸入或倒入内套管(已插在外套管),13500 g离心1min

3) 取出内套管外套管中液体后放回内套管,加入500 μl洗液RW13500 g离心1min

4) 重复步骤3再洗一次。

5)  取出内套管 [ 点击数:] [打印本网页] [关闭本窗口]

 

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